甘油三酯(TG)含量试剂盒-微量法-上海凯发K8旗舰生物科技有限公司   
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    生化试剂盒

    甘油三酯(TG)含量试剂盒-微量法
    凯发K8旗舰生物生化试剂盒应用领域广泛,涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪,分光光度计和荧光酶标仪。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户给予高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些保证了我们向您给予的最专业最优质的服务。


    中文名称

    甘油三酯(TG)含量试剂盒-微量法  

    规格 96样
    货号

    L-741-SH

    价格 ¥850
    样本类型 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等
    检测范围 详见说明书
    检测方法

    微量法  

    货期 3-5天
    说明书 咨询我司业务员获取
    文献 咨询我司业务员获取

        :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义:

    TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

     

    测定原理:

    用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。

     

    自备仪器和用品:

    酶标仪、台式离心机、可调式移液、96孔板、研钵、冰和蒸馏

     

    试剂组成和配置:

    试剂一:液体120 mL×1瓶,4℃保存。

    试剂二:液体12 mL×1瓶,4℃保存。

    试剂三:液体12 mL×1瓶,4℃避光保存。

     

    TG的提取:

    1、 组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

    2、细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s,8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

    3、血清(浆)样品:直接测定。

     

    测定操作:

    酶标仪预热30min,调节波长到505 nm

    试剂(μL

    空白管

    测定管

    样本

     

    10

    试剂一

    10

     

    试剂二

    95

    95

    试剂三

    95

    95

    混匀,室温下静置20min,505 nm波长处读取吸光值,记为A白和A测定,△A=A测定-A空白。空白管只需测一管。

    计算公式:

    标准曲线:y = 0.3261x - 0.0199; R2 = 0.9979x:标准品浓度(mg/mLy:吸光值差值ΔA。

    1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

    TG含量(mg/mL=(ΔA+0.0199÷ 0.3261=3.07×(ΔA+0.0199

    2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:

    (1)按样本蛋白浓度计算

    TG含量(mg/ mg prot= (ΔA+0.0199)÷0.3261×V÷(Cpr×V样)=3.07×(ΔA+0.0199÷Cpr

    (2)按样本质量计算

    TG含量(mg/ g 鲜重=(ΔA+0.0199÷0.3261×V÷(W×V÷V样总)=3.07×(ΔA+0.0199÷ W

    V样:加入样本体积,0.01 mLV样总:加入试剂一体积,1 mLW:样质量,g

    Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

     

    注意事项:

    1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

    2. 最低检出限为100μg/mL


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