超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法-上海凯发K8旗舰生物科技有限公司   


凯发K8旗舰

欢迎选择我们,上海凯发K8旗舰生物科技有限公司!免费服务热线:400-0899-208          防伪查询

语言:Eng

您当前的位置:
凯发K8旗舰>
产品中心>
生化试剂盒>
超氧化物歧化酶(SOD)...

生化试剂盒

超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法
上海凯发K8旗舰生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。凯发K8旗舰品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。
中文名称 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法
规格 96样
货号

A-002-SH

价格 ¥700
样本类型 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等
检测范围 详见说明书
检测方法 微板法
货期 3-5天
说明书 咨询我司业务员获取
文献 咨询我司业务员获取


注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义:

SODEC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2 O2SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。

 

测定原理:

顺利获得黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可与 WST-8 反应产生水溶性染料甲臜,后者在 450nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液黄色越深,说明 SOD 活性愈低,反之活性越高。

 

需自备的仪器和用品:

酶标仪、离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

 

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃避光保存;

试剂二:液体 150μL×1 支,4℃避光保存;

试剂三:液体 100μL×1 支,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。

 

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

 

测定步骤:

1、 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 450nm

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释 50 倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水 1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入 100μL 试剂二,充分混匀。配好的试剂 4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照 20mL:0.1mL 的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

 

5、 样本测定(在 96 孔板中依次加入下列试剂)

 

试剂名称(μL

测定管

对照管

样本

10

 

蒸馏水

 

10

试剂三(稀释后)

10

10

工作液

160

160

试剂四

20

20


充分混匀,室温静置 30min 后,450nm 处测定各管吸光值 A

 

注意事项:

1、试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、SOD 为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10 倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 

SOD 活性计算:

1、抑制百分率的计算

抑制百分率=(A 对照管-A 测定管) ÷A 对照管× 100%

尽量使样本的抑制百分率在 10-90%范围内。如果计算出来的抑制百分率小于 10%或大于90%,则通常需要调整加样量后重新测定。如果测定出来的抑制百分率偏高,则需将样本用提取液适当稀释;如果测定出来的抑制百分率偏低,则需重新准备浓度比较高的待测样本。

2、SOD 酶活性单位:

3、在上述黄嘌呤氧化酶藕联反应体系中抑制百分率为 50%时,反应体系中的 SOD 酶活力定义为一个酶活力单位(U/mL)

3、SOD 酶活性计算:

1)血清(浆)SOD 活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷V =20×抑制百分率÷(1-抑制百分率)

2)组织、细菌或培养细胞 SOD 活力计算:

a.按样本蛋白浓度计算

SOD 活性(U/mg prot)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷(V 样×Cpr)

=20×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷Cpr需要另外测定,建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

b.按样本鲜重计算

SOD 活性(U/g 鲜重)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷(W ×V 样÷V 样总) =20×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷W

c.按细菌或细胞个数计算

SOD 活力(U/104 cell)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率) ×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)

=0.04×抑制百分率÷(1-抑制百分率)

V反总:反应体系总体积,0.2mLV 样:加入反应体系中样本体积,0.01mL

V 样总:加入提取液体积,1 mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mL W:样本质量,g500:细胞或细菌总数,500 万。



甜菜碱(Betaine)试剂盒
多酚氧化酶(PPO)试剂盒
脯氨酸(PRO)含量试剂盒
DPPH清除能力试剂盒
超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-NBT法
抗脂质过氧化能力/LPO抑制率测定试剂盒
超氧阴离子自由基清除能力试剂盒(邻苯三酚法)
总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒(FRAP法)

在线询价

  • *
  • *
  • *
  • *
  • *
  • *

相关产品

γ-氨基丁酸(GABA)含量试剂盒 微板法

γ-氨基丁酸(GABA)含量试剂盒 微板法

上海凯发K8旗舰生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。凯发K8旗舰品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

查看详细
直链淀粉含量试剂盒-微板法

直链淀粉含量试剂盒-微板法

上海凯发K8旗舰生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。凯发K8旗舰品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

查看详细
多功能氧化酶(MFO)试剂盒-微量法

多功能氧化酶(MFO)试剂盒-微量法

上海凯发K8旗舰生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。凯发K8旗舰品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

查看详细

请输入搜索关键字

确定